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人脐静脉内皮细胞的形态学观察和鉴定

发布时间:2018-03-30 14:51 |  点击次数:

人脐静脉内皮细胞(Sciencell #8000)的形态学观察及鉴定:细胞换液后直接在倒置显微镜下观察细胞的形态及生长特征,并作相差摄影,同时进行常规HE染色观察并摄片。鉴定采用DAB免疫组织化学法,在6孔培养板中放置载玻片,在玻片上植入2ml含有1×106的细胞悬液,待细胞贴壁后,取出载玻片,放入-20℃的冷丙酮中固定30min,用PBS冲洗3次,每次2min,滴加3%H2O2室温孵育10min,PBS冲洗3次,每次2min,以消除内源性过氧化物酶的活性。滴加兔抗人Ⅷ因子相关抗原多抗工作液,放入湿盒内4℃过夜,同时另一盖玻片不加一抗作阴性对照。次日,用PBS冲洗3次,每次2min,滴加辣根酶标记的羊抗兔IgG, 37℃孵育30min, 用PBS冲洗3次,每次2min,用DAB底物混合工作液显色,显微镜下观察,待出现特异性染色后,终止显色,进行复染,脱水,透明,封片,相差显微镜下观察摄影。
 



人脐静脉内皮细胞(Sciencell #8000)的形态学观察:相差倒置显微镜下观察,人脐静脉内皮细胞贴壁单层生长,呈短梭状或铺路石样镶嵌排列,细胞为扁平多角形,边界清楚,胞浆丰富。胞核清晰可见,为圆形或椭圆形。原代培养细胞,于接种后2h开始贴壁生长,传代细胞约半小时后即开始贴壁生长。原代细胞一周左右可长满,传代细胞生长旺盛,有时可见多核细胞。

Ⅷ因子相关抗原免疫组化鉴定:人脐静脉内皮细胞(Sciencell #8000)Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色可见细胞呈圆形、梭形或多边形,胞浆内可见棕黄色颗粒,核周密集,而对照组内未见着色。证实培养的细胞为内皮细胞。
北京裕恒丰科技有限公司作为第一家引进美国ScienCell 原代细胞等细胞产品的领头人,为国内各大院校、科研机构提供了高质量的、价格公道的进口原代细胞,并为每一种原代细胞搭配适合自己的培养基,并且培养基中包括生长因子、高质量胎牛血清、双抗,试验中当时混匀即可,操作简单快速,促进了原代细胞的生长能力,大大提高了细胞的传代次数。

裕恒丰不仅能给大家提供原代细胞和细胞培养基,还提供转染试剂,细胞检测试剂盒等细胞产品,以及cDNA、total RNA、miRNA、细胞裂解液等分子生物学产品。长期以来我们凭借卓越的产品质量,丰富的行业经验,强大的技术实力,完善的售后服务,使公司在业内赢得了良好的企业声誉。本着诚信、专业、热忱的宗旨,公司将竭诚为您服务。



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